Аннексин V, известный также как плацентарный антикоагулянтный протеин (PAP-1) [1], представляет собой анионный фосфолипид-связывающий белок, локализующийся во многих тканях, главным образом на эндотелиальных клетках и в плаценте [2, 3]. Он обладает антикоагулянтной активностью, обусловленной связыванием и нейтрализацией экспонированных отрицательно заряженных фосфолипидов на поверхности активированной клетки [4]. Так, во время физиологической беременности, в период дифференцировки и инвазии трофобласта, происходит экспонирование фосфатидилсерина на поверхности клеток синцитиотрофобласта. Это является физиологическим сигналом для начала таких процессов, как коагуляция и апоптоз, но внеклеточный аннексин V распознает этот сигнал и, высокоспецифически связываясь с фосфатидилсерином, покрывает его по типу «ковра», предотвращая чрезмерную фосфолипидзависимую реакцию коагуляции [4].
Механизмы, приводящие к появлению антител к аннексину V, до конца не ясны. Предполагают, что в условиях повышенного апоптоза внеклеточный аннексин V может представлять антигенный стимул для генерации антител [5].
Установлено отрицательное воздействие антител к аннексину V на течение репродуктивного процесса. Они снижают уровень секреции хорионического гонадотропина, индуцируют апоптоз клеток трофобласта и эндотелиальных клеток, связываясь с аннексином V, блокируют его физиологические свойства, повышая тромбогенность сосудистой стенки.
Невынашивание беременности, по мнению большинства исследователей, часто обусловлено иммунными нарушениями, в частности антифосфолипидным синдромом [6–10]. В лабораторные диагностические критерии антифосфолипидного синдрома, утвержденные в 2006 г. в Саппоро, входит выявление антител к кардиолипину, β2-гликопротеину I и определение волчаночного антикоагулянта [11]. Выявление антител к другим антигенам, таким как аннексин V, не включено в диагностические критерии данной патологии.
В силу того, что довольно часто наблюдается изолированное повышение антител к аннексину V у женщин с привычным невынашиванием беременности при нормальных показателях других аутоиммунных маркеров, нами проведено исследование, целью которого было проанализировать связь наличия антител к аннексину V с репродуктивными неудачами у женщин, поступивших на лечение в институт акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта по поводу невынашивания беременности.
Материал и методы исследования
В исследование были включены 153 беременные женщины, из которых основную группу составили 119 беременных женщин с привычным невынашиванием и 34 – с физиологическим течением беременности, составившие контрольную группу. Все обследованные женщины не имели анатомических изменений, гормональных дисфункций, тяжелой соматической патологии.
Возраст пациенток в группах колебался от 22 до 39 лет, средний возраст – 30,0±7,0 года. Средний возраст женщин основной группы составил 29,3±6,9 года, контрольной группы – 29,8±6,6 года.
Определение уровня антител проводилось с помощью иммуноферментного анализа с использованием наборов фирмы Orgentec (Германия).
Результаты исследования
Одновременно с антителами к аннексину V (IgG/IgM) определяли уровень антифосфолипидных антител (к кардиолипину, фосфатидилсерину, фосфатидилинозитолу, фосфатидиловой кислоте) (IgG/IgM), антител к β2-гликопротеину I (IgGAM) и концентрацию сывороточного аннексина V. Данные, представленные на рисунке, свидетельствуют, что частота встречаемости антител к аннексину V (20,1%) была выше по сравнению с частотой встречаемости антифосфолипидных антител (1,68%) и антител к β2-гликопротеину I (11,7%).
Также нами отмечено повышенное содержание антител к β2-гликопротеину I, антител к аннексину V и сывороточного аннексина V в группе женщин с привычным невынашиванием беременности по сравнению с контрольной группой женщин с физиологически протекающей беременностью (рисунок).
Проведенный корреляционный анализ не показал связи между повышением титра антител к β2-гликопротеину I, антифосфолипидным антителам и антителам к аннексину V. Только у двух пациенток отмечалось сочетанное увеличение антифосфолипидных антител, антител к β2-гликопротеину I и антител к аннексину V. У остальных пациенток отмечалось независимое их увеличение.
Обсуждение результатов
Интерес к роли сывороточного аннексина V и антител к нему в репродуктивных неудачах появился в 1990-х годах [12]. Было высказано предположение, что антитела к аннексину V связаны с тромботическими осложнениями. Они определялись у больных системными аутоиммунными заболеваниями, а также при потерях беременности, преэклампсии, артериальных и венозных тромбозах. Эти антитела признавались как кофакторы для антифосфолипидных антител. Однако позже определение антител к аннексину V не было включено в комплекс анализов, определяющих антифосфолипидный синдром [11].
Более того, некоторые авторы отрицают связь антител к аннексину V с репродуктивными потерями [13, 14].
Так, диагностическое значение повышенного уровня антител к аннексину V изучалось многими исследователями [13–16], но результаты этих исследований остаются спорными. Анализ данных, описанных в литературе, показал, что в первом пилотном исследовании, проведенном в 1994 году японским ученым Matsuda [12], антитела к аннексину V были обнаружены у женщин с системной красной волчанкой (СКВ). Предположили, что они являются независимыми факторами риска тромбозов у этих пациентов. Далее, другая группа авторов обнаружила антитела к аннексину V у 19% больных СКВ и подчеркнула, что эти антитела наиболее часто встречается у больных с артериальными или венозными тромбозами, внутриутробной гибелью плода [17]. В 1999 году Satoh опубликовал аналогичные результаты и подчеркнул важность определения антител к аннексину V у больных СКВ [18]. Zammiti получил данные о связи поздних выкидышей с антителами к аннексину V и обнаружил, что антитела к аннексину V и антитела к β2-гликопротеину I являются независимыми факторами риска невынашивания беременности [19, 20].
Однако Arnold и Holmes показали, что имеется высокая распространенность антител к аннексину V у женщин с привычным невынашиванием беременности и антифосфолипидным синдромом, но, тем не менее, антитела к аннексину V, при этом не являются независимым фактором риска невынашивания беременности [14]. Также испанские исследователи J. Alijotas-Reig, R. Ferrer-Oliveras (2010) провели работу по оценке роли антител к аннексину V как фактора риска потери плода у женщин с привычным невынашиванием. Согласно полученным ими результатам, антитела к аннексину V могут играть ту же роль, что и антитела к β2-гликопротеину I, кардиолипину, волчаночный антикоагулянт, в генезе невынашивания беременности, но рассматривать антитела к аннексину V как независимый фактор риска для потери плода не следует [13].
Проведенное нами исследование показало, что частота выявления антител к аннексину V у женщин с привычным невынашиванием беременности повышена по сравнению с контрольной группой женщин с физиологическим течением беременности. Причем частота встречаемости антител к аннексину V в группе женщин с привычным невынашиванием выше по сравнению с частотой встречаемости антифосфолипидных антител и антител к β2-гликопротеину I. Также в нашем исследовании показано, что наблюдается в основном изолированное повышение антител к аннексину V. Только у двух пациенток отмечалось сочетанное увеличение антифосфолипидных антител, антител к β2-гликопротеину I и антител к аннексину V. По данным литературы [19–22] и результатам наших исследований, антитела к аннексину V являются независимым фактором риска, выявляемым у пациенток с привычным невынашиванием беременности, и подтверждают необходимость их определения в рутинной практике для обследования этого контингента женщин.
