The morphofunctional status of the endometrium in stimulated in vitro fertilization cycles

Mityurina E.V., Perminova S.G., Demura T.A., Gallyamova E.M.

Academician V.I. Kulakov Research Center of Obstetrics, Gynecology, and Perinatology, Ministry of Health of Russia, Moscow
Objective. To evaluate the impact of ovarian stimulation and to estimate the level of serum progesterone (P) in the late follicular phase of the cycle in GnRH agonist protocols on endometrial receptivity.
Subjects and methods. Morphological and immunohistochemical (IHC) examinations were made of 50 endometrial biopsy specimens, including 28 ones obtained on the day of oocyte aspiration in the therapeutic cycle of IVF without further embryo transfer (a study group) and 22 ones taken in the natural cycle (the day of luteinizing hormone + 7) (a comparison group). Ovarian function was stimulated according to the standard long protocol using recombinant follicle-stimulating hormone and human menopausal gonadotropin. Serum P concentrations were determined on the day of ovulation triggering. The serum P threshold value was used to identify premature luteinization, which was equivalent to 4.77 nmol/l. The patients were divided into groups according to the level of P on the day of human chorionic gonadotropin administration: 1) Р ≥ 4.77 nmol/l (n = 13); 2) Р< 4.77 nmol/l (n = 15).
Results. On the day of oocyte aspiration, most (75%) of the patients were observed to have secretory transformation of the endometrium, as well as mature or regressing pinopodia on more than 20% of the endometrial surface in 100% of cases, which was similar to the implantation window in the natural cycle. IHC examination of the endometrium indicated that on the day of oocyte aspiration the expression of progesterone receptors (PR) in the endometrial glands (142.1±8.1%) was similar to the natural cycle during the implantation window (112.5±15.1; р = 0.470); that in the stroma was substantially lower (144.2±7.8 and 176.8±7.7, respectively; р = 0.001). In the stimulated cycle, the amount of estrogen receptors (ER) in the glands and stroma averaged 128.9±4.1 and 27.8±4.1%, respectively. In the implantation window of a natural cycle, the expression of ER in the glands was considerably lower (mean 92.9±12.0%; р = 0.018); it was much higher in the stroma (mean 66.1±9.3%; р = 0.001). In the stimulated cycle, the expressions of leukemia inhibitory factor in the surface epithelium and endometrial stroma (2.2±0.5 and 2.3±0.3) corresponded to those in the implantation window in the natural cycle (3.75±0.5 and 3.2±0.4; р = 0.07 and р = 0.180) and significantly lower in the glands and pinopodia. The results of endometrial dating using the Noyes criteria demonstrated that in the patients with a serum P level of < 4.77 nmol/l on the day of ovulation triggering, the endometrium on the day of oocyte aspiration was equal to 15.2±0.5 days of the cycle, by advancing the development by an average of 2.6±0.4 days; the endometrium at Р ≥ 4.77 nmol/l, was equal to 17.4±0.6 days of the cycle, by advancing the development by an average of 4.09±0.6 days (р = 0.023 and р = 0.048). The expressions of PR in the glands (126.6±13.1%) and stroma (130.6±12.8%) with normal P levels on the day of ovulation triggering were much lower than those in the elevated P group (160.0±5.9% (in the gland); р = 0.042; 163.3±5.4% (in the stroma); р = 0.041. The expression of ER in both the glands and stroma was similar in the groups. That of LIF in the endometrial stroma was significantly higher in the patients with elevated P levels (3.2±0.5 and 1.6±0.4 scores; р = 0.05). Mature pinopidia on the day of transvaginal oocyte retrieval were detected with an equal frequency in patients with normal or higher P levels (93.3% and 92.3%; р = 0.918).
Conclusion. Ovarian stimulation in the IVF programs and as a result an anticipatory increase in P levels give rise to advanced endometrial maturation, as demonstrated by the detection of secretory transformation of the endometrium on the day of oocyte aspiration, mature pinopidia, decreased ER expression in the stroma, and early LIF expression in the epithelium and stroma.

Keywords

premature luteinization
progesterone elevation
in vitro fertilization
endometrial receptivity
pinopidia
progesterone receptors
estrogen receptors
leukemia inhibitory factor
Noyes criteria

Решающую роль в процессе имплантации эмбриона играет рецептивность эндометрия – комплекс структурно-функциональных характеристик эндометрия с четкими временными и пространственными константами, определяющими способность эндометрия к имплантации [1]. Эндометрий восприимчив к имплантации бластоцисты только в течение ограниченного периода времени «окна имплантации», период которого составляет несколько дней – примерно с 20-го по 24-й день нормального менструального цикла, на 6–10-й 
день после пика лютеинизирующего гормона ЛГ) 2–4]. Хорошо известно, что изменения уровней сывороточных гормонов в естественном менструальном цикле, которые предопределяют развитие эндометрия, значительно изменяются в стимулированных циклах программ экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), в связи с чем «окно имплантации» может изменяться во времени или отсутствовать [5].

Влияние стимуляции суперовуляции на рецептивность эндометрия была показана в исследовании J.H. Check и соавт. (1992), в котором частота имплантации была значительно ниже у доноров ооцитов, чем у соответствующих по возрасту и качеству эмбрионов реципиентов [2, 6]. 
Доказательством негативного эффекта овариальной стимуляции на рецептивность эндометрия также является более высокая частота имплантации, клинической и прогрессирующей беременности в криоциклах ЭКО [7]. В исследованиях, оценивающих эндометрий в стимулированных циклах ЭКО в сравнении с натуральным циклом, были выявлены преждевременная секреторная трансформация и изменение экспрессии маркеров рецептивности в постовуляторную и раннюю лютеиновую фазы, что, возможно, приводит к несинхронному взаимодействию между жизнеспособным эмбрионом и рецептивным или субрецептивным эндометрием. Однако данные о влиянии овариальной стимуляции на эндометрий противоречивы. Так, результаты исследований A.J. evi и соавт. (2001), M.H. Van der Gaast и соавт. (2008) не выявили различий в экспрессии различных маркеров рецептивности эндометрия при сравнении натуральных и стимулированных циклов [8, 9].

Результатом овариальной стимуляции и одной из возможных причин негативного влияния на рецептивность эндометрия может быть повышение уровня сывороточного прогестерона P) в день назначения препаратов хорионического гонадотропина человека (ХГч) для финального созревания ооцитов [10, 11]. Этот феномен, получивший название «преждевременная лютеинизация» (ПЛ), является одной из причин низкой эффективности программ ЭКО и по разным данным осложняет 12,4–52,3% циклов с использованием аналогов гонадотропин-рилизинг гормона (ГнРГ) [12]. До настоящего времени не определен абсолютный уровень Р, позволяющий установить наличие ПЛ. Верхняя его граница по данным различных исследований колеблется от 0,8 до 2,0 нг/мл [12]. 
Остаются непонятными механизмы влияния на рецептивность эндометрия повышенных концентраций Р в день введения триггера. С. uang и соавт. (2012) показали, что продолжительное повышение концентрации Р приводит к преждевременному созреванию эндометрия и, как следствие, раннему закрытию «окна имплантации» и снижению частоты наступления беременности [13]. 
При этом высказано предположение, что именно продолжительность воздействия Р, а не его абсолютный уровень имеет решающее значение для адекватного функционирования «окна имплантации» [4, 13]. Более того, результаты исследования М. Melo и соавт. (2006), проведенного в программе донации ooцитов, показали, что на частоту наступления беременности реципиентов не влиял сывороточный уровень Р доноров в конце стимуляции, что также позволяет предположить неблагоприятное влияние ПЛ на эндометрий [11].

Отсутствие однозначных данных о влиянии ПЛ на рецептивность эндометрия послужило основанием для проведения настоящего исследования. Целью исследования была оценка влияния овариальной стимуляции и уровня сывороточного Р в позднюю фолликулярную фазу цикла в протоколах с агонистами ГнРГ на рецептивность эндометрия.

Материал и методы исследования

Основную группу составили 19 доноров ооцитов и 9 пациенток с трубно-перитонеальным и/или мужским факторами бесплодия, группу сравнения  22 пациентки с трубно-перитонеальным 
и/или мужским факторами бесплодия. Причиной для отмены переноса в лечебном цикле явились: у 4 пациенток – сохранение генетического материала и у 5 – проведение преимплантационной генетической диагностики.

Стимуляцию функции яичников проводили по стандартному длинному протоколу с использованием препаратов рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (рФСГ) и человеческого менопаузального гонадотропина (чМГ). В день введения овуляторной дозы ХГч 10000 МЕ для финального созревания ооцитов определяли сывороточную концентрацию Р. Использовали пороговое значение сывороточного уровня Р для определения преждевременной лютеинизации – 4,77 нмоль/л (1,5 нг/мл; коэффициент пересчета 3,18). Пороговое значение Р в день введения триггера овуляции было выбрано на основании данных литературы [14]. В зависимости от уровня Р в день введения ХГч пациентки основной группы были разделены: 1-я группа (n=13) – 
Р≥4,77 нмоль/л; 2-я группа (n=15) – Р<4,77 нмоль/л. Аспирационная пайпель-биопсия эндометрия проводилась из области дна матки с помощью аспирационной кюретки Pipelle de Cornier (Laboratoire C.C.D., Франция) в день забора ооцитов. День пайпель-биопсии эндометрия в группе сравнения определяли по пику ЛГ в мочевом тесте (ЛГ+7).

Проведено морфологическое и иммуногистохимическое (ИГХ) исследование 50 биоптатов эндометрия, в том числе 28 (основная группа) полученных в день аспирации ооцитов в лечебном цикле ЭКО без последующего переноса эмбрионов, и 22 (группа сравнения) – в натуральном цикле (день ЛГ+7).

Материалы биоптатов фиксировали в 10% нейтральном формалине в течение 24 ч. Образцы были обработаны по общепринятой стандартной методике и заключены в парафин. Срезы толщиной 4 мкм готовили на роторных микротомах и окрашивали гематоксилином и эозином. Исследование гистологических препаратов проводилось в световом микроскопе при увеличении от х50 до х600. Гистологическое датирование эндометрия, оценку процента клеток поверхностного эпителия с наличием зрелых пиноподий осуществляли в световом микроскопе при увеличении х400 в 5 полях зрения. ИГХ реакции проводили на серийных депарафинированных срезах толщиной 3–4 мкм по общепринятым методикам (DAKO protocols).

Определение стероидных рецепторов проводили с использованием мышиных моноклональных антител к ЭРα (клон 1D5 RTU«DAKO», Дания) и ПР-А (клон 636 RTU«DAKO», Дания). Для выявления экспрессии лейкемия ингибирующего фактора (ЛИФ) использовали первичные антитела к ЛИФ (R@DSystems, USA, clone: 9824, 1:100).

Анализ результатов ИГХ-реакций для эстрогеновых рецепторов (ЭРα) и прогестероновых рецепторов (ПР) проводили с учетом количества окрашенных клеток и интенсивности окраски в железах и строме эндометрия, используя метод гистологического счета Н-score по формуле: HS=1a±2b±3c, где а – процент слабо окрашенных клеток, b – процент умеренно окрашенных клеток, с – процент интенсивно окрашенных клеток; 1, 2, 3 – интенсивность окрашивания, выраженная в баллах.

Степень выраженности экспрессии ЭРα и ПР расценивали следующим образом: 0–10 баллов – отсутствие экспрессии, 11–100 баллов – слабая экспрессия, 101–200 баллов – умеренная экспрессия, 201–300 баллов – выраженная экспрессия. Рассматривали также коэффициент ПР/ЭР, рассчитанный по строме.

Пиноподии оценивались как изобилующие, умеренные и незначительные в зависимости от процента занимаемой ими поверхности эндометрия (>50, 20–50 и <20 соответственно).

Результаты ИГХ реакции для ЛИФ оценивали полуколичественным методом в баллах по общепринятой методике: отсутствие иммуноокрашенных клеток (-) – 0 баллов, менее 5% иммуноокрашенных клеток (±) – 0,5 балла, менее 20% иммуноокрашенных клеток (+) – 2 балла, от 20 до 40% иммуноокрашенных клеток (++) – 4 балла, более 40% иммуноокрашенных клеток (+++) – 6 баллов.

Датирование эндометрия проводили по критериям Noeyes [15]. День аспирации ооцитов расценивали как 14-й день условного 28-дневного цикла.

Информированное согласие на участие в исследовании было получено у всех пациенток.

Статистический анализ результатов проводили с использованием программы IPM SРSS Statistics, версия 21. Для сравнения непараметрических данных применяли метод Манна–Уитни (для 2 групп) для несвязанных совокупностей; критерий χ2 для таблиц сопряженности признаков 2*2, 2*3 и 2*4 (для сравнения частот встречаемости признаков в анализируемых группах). Результаты представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего (М±m). Статистически значимыми считали отличия при р<0,05 (95% уровень значимости).

Результаты исследования

Анализ морфологической структуры эндометрия в стимулированном цикле показал, что в день аспирации ооцитов у большинства пациенток (75%) наблюдалась секреторная трансформация эндометрия. При этом ранняя стадия фазы секреции обнаружена у 15 (53,6%), средняя стадия фазы секреции – у 4 (14,3%) и поздняя стадия фазы секреции – у 2 (7,1%) пациенток. Средняя и поздняя стадия фазы пролиферации встретилась в 1 (3,6%) и 6 (21,4%) случаях соответственно. В «окно имплантации» естественного цикла преобладала средняя стадия фазы секреции (рис. 1 см. на вклейке).

При оценке поверхностного эпителия эндометрия было установлено, что в стимулированном цикле в день получения ооцитов пиноподии выявлялись в 100% случаев, из них у 26 (92,9%) – 
зрелые и у 2 (7,1%) – регрессирующие (рис. 2 см. на вклейке). В «окно имплантации» натурального цикла пиноподии также наблюдались во всех образцах эндометрия. При этом в стимулированном цикле среднее количество клеток поверхностного эпителия, содержащих пиноподии, составило 21,7±1,7%, что было сопоставимо с натуральным циклом в «окно имплантации» (22,8±3,1%; р=0,937).

При ИГХ-исследовании эндометрия в день аспирации ооцитов наблюдалась умеренная и высокая экспрессия ПР в железах и строме эндометрия. В железах уровень колебался от 10 до 200% и составил в среднем 142,1±8,1%. В строме наблюдалась экспрессия ПР от 10 до 220%, среднее значение составило 144,2±7,8% (табл. 1).

Экспрессия ПР в железах в день аспирации ооцитов была сопоставима с натуральным циклом в «окно имплантации» (112,5±15,1; р=0,470), а в строме – существенно ниже (144,2±7,8 и 176,8±7,7; р=0,001). Показатели экспрессии ЭРα в железах эндометрия стимулированного цикла были умеренными, в строме – низкими (рис. 3 см. на вклейке).

Количество ЭРα в железах находилось в пределах от 20 до 180%, в среднем – 128,9±4,1%. В строме уровень ЭРα колебался от 4 до 70%, среднее значение составило 27,8±4,1%. В «окно имплантации» натурального цикла экспрессия ЭРα в железах колебалась от 5 до 200% (в среднем 92,9±12,0%), что было существенно ниже, чем в стимулированном цикле (р=0,018). В строме экспрессия ЭРα составила от 5 до 180% (в среднем 66,1±9,3%), что значительно превышало этот показатель в стимулированном цикле (р=0,001).

Коэффициент ПР/ЭРα в строме эндометрия стимулированного цикла в день аспирации ооцитов был значительно выше (8,8±1,3), чем в «окно имплантации» натурального цикла (3,2±0,5; р=0,002), что, вероятно, связано с высокой экспрессией ПР и низкой ЭРα.

В стимулированном цикле у 23 из 28 пациенток (82,1%) в день аспирации ооцитов была выявлена экспрессия ЛИФ (рис. 4). При этом экспрессия ЛИФ в поверхностном эпителии и в строме соответствовала аналогичному показателю в «окно имплантации» натурального цикла, а в железах и пиноподиях была существенно ниже (табл. 1).

Таким образом, наличие секреторной трансформации эндометрия, обнаружение зрелых пиноподий, снижение экспрессии ЭР в строме, а также ранняя экспрессия ЛИФ в эпителии и строме в день аспирации ооцитов свидетельствует об опережении созревания эндометрия в стимулированных циклах. Эти данные подтверждаются результатами датирования эндометрия по критериям Noyes, согласно которым эндометрий в стимулированных циклах в день аспирации ооцитов в среднем соответствовал 16,29±0,4 дню условного 28-дневного цикла, опережая при этом на 3,2±0,4 дня.

Датирование эндометрия по критериям Noyes в зависимости от уровня Р в день введения ХГч показало, что у 5 (33,3%) пациенток с нормальным уровнем Р эндометрий в день аспирации ооцитов соответствовал дню цикла. При повышенном уровне Р у 1 из 13 (7,7%) пациенток наблюдалось отставание и у 12 из 13 (92,3%) – опережение развития эндометрия. У пациенток с повышенным уровнем сывороточного Р эндометрий в день аспирации ооцитов соответствовал 17,4±0,6 дню цикла, опережая развитие в среднем на 4,09±0,6 дня. При нормальном уровне Р эндометрий в этот день соответствовал 15,2±0,5 дню цикла, опережая развитие в среднем на 2,6±0,4 дня. При этом разница была статистически значима (табл. 2).

При анализе экспрессии рецепторов ПР и ЭРα в эндометрии в зависимости от уровня Р в день введения ХГч (табл. 3) выявлена статистически значимая разница экспрессии ПР в железах и строме. При нормальном уровне Р в день введения триггера овуляции экспрессия ПР в железах колебалась от 10 до 180%, в среднем 126,6±13,1%. В группе с повышенным уровнем Р – от 120 до 200% среднее значение составило 160,0±5,9% (р=0,042). При нормальном уровне Р в день введения триггера овуляции экспрессия ПР в строме находилась в пределах от 10 до 220% (среднее значение 130,6±12,8%), при повышенном Р – от 120 до 200% (среднее значение 163,3±5,4%; р=0,041).

Экспрессия ЭРα как в железах, так и строме была сопоставима между группами. Также не было выявлено различий в коэффициенте 
ПР/ЭРα в строме эндометрия (8,8±2,0 и 9,0±1,4; р=0,764). Экспрессия ЛИФ в строме эндометрия была существенно выше у пациенток в повышенным уровнем Р (3,2±0,5 и 1,6±0,4 балла; р=0,05). Зрелые пиноподии в день аспирации ооцитов выявлялись с одинаковой частотой у пациенток с нормальным и повышенным Р (93,3 и 92,3%; р=0,918).

Таким образом, оценка эндометрия в день аспирации ооцитов показала, что у пациенток с повышенным уровнем сывороточного Р в день введения триггера овуляции наблюдается опережение развитие эндометрия в среднем на 4,09±0,6 дня, ранняя экспрессия ЛИФ преимущественно в строме эндометрия, умеренная экспрессия ПР в железах и строме, появление зрелых пиноподий более чем на 20% поверхности эпителия.

Обсуждение

Одной из возможных причин неудач ЭКО может быть изменение рецептивности эндометрия в стимулированных циклах. Поскольку эффективность программы ЭКО во многом зависит от функциональной зрелости и готовности эндометрия к имплантации, а также от синхронизации с развитием эмбриона, то предполагают, что беременность не наступает при опережении развития эндометрия более чем на 3 дня [2, 16, 17].

В данном исследовании результаты гистологического датирования эндометрия по критериям Noyes в день аспирации ооцитов свидетельствуют об опережении развития эндометрия. При этом у пациенток с повышенным уровнем сывороточного Р в день введения ХГч имеет место опережение развития более, чем на 3 дня. Полученными данными можно объяснить снижение частоты наступления беременности в циклах с ПЛ. Большинство исследователей подтверждают опережение созревания эндометрия при проведении овариальной стимуляции. Так, E. Kolibianakis и соавт. (2002) выявили опережение развития эндометрия в среднем на 2,5±0,1 дня при стимуляции рФСГ в протоколе с антагонистом ГнРГ [17]. Результаты гистологического датирования эндометрия в исследовании I. Van Vaerenbergh и соавт (2009) показали, что во всех образцах эндометрия, полученных в день аспирации ооцитов, наблюдалось опережение развития эндометрия от +2 до +4 дней [18]. С другой стороны, в исследовании 
D. Kyrou и соавт (2009) в большинстве случаев эндометрий в день введения ХГч соответствовал поздней стадии пролиферации [19].

Известно, что в естественном менструальном цикле экспрессия в эндометрии рецепторов к стероидным гормонам претерпевает закономерные изменения, синхронные с изменением концентрации эстрадиола и Р в крови. В позднюю стадию фазы пролиферации естественного менструального цикла наблюдается максимальная экспрессия ПР и ЭРα в эндометрии [20]. Во время фазы секреции экспрессия ЭРα снижается во всех клетках эндометрия, а снижение ПР отмечено лишь в эпителиальных клетках, в то время как стромальные клетки поддерживают экспрессию ПР и сохраняют чувствительность к Р [2, 21]. При проведении стимуляции функции яичников умеренная экспрессия ЭРα в железах и низкая в строме эндометрия, выявленная нами в день аспирации ооцитов, свидетельствует о раннем снижении уровня ЭРα в строме и подтверждает мнение об опережении созревания эндометрия. При этом экспрессия ПР в железах в день аспирации ооцитов соответствовала таковой в «окно имплантации» натурального цикла и была существенно выше при повышенных уровнях Р в день введения триггера овуляции. Эти данные согласуются с результатами исследования Е. Рapanikolaou и соавт. (2005). Авторами при оценке эндометрия в позднюю фолликулярную фазу в циклах с антагонистом ГнРГ было показано, что экспрессия ЭРα и ПР в эндометрии в день введения ХГч сходна с таковой в первые дни лютеиновой фазы естественного цикла [21]. 
Однако данные об экспрессии стероидных рецепторов в эндометрии стимулированных циклов значительно варьируют от полного уменьшения их экспрессии до увеличения в железах [4]. Так, D. Kyrou и соавт. (2009) в фолликулярной фазе стимулированного цикла выявили повышенную экспрессию ПР во всех клетках эндометрия [19]. C. Bourgain и соавт. (2003) было обнаружено уменьшение экспрессии ПР в железах и строме в периовуляторную и лютеиновую фазы [4].

Об изменении экспрессии стероидных рецепторов при овариальной стимуляции в циклах ЭКО свидетельствует и высокое соотношение ПР/ЭРα, что не характерно для этой фазы цикла. По данным литературы коэффициент ПР/ЭРα в строме эндометрия в позднюю фазу стадии пролиферации натурального цикла не превышает 1, в «окно имплантации» находится в диапазоне от 2 до 4 [20].

Известно, что в естественном цикле пиноподии появляются на 6–8-й день после овуляции и присутствуют на поверхности эпителия полости матки не более чем в течение 48 часов [3, 22]. При этом появление пиноподий совпадает с увеличением уровня сывороточного Р и снижением количества ПР [20]. Обнаружение в данном исследовании зрелых пиноподий в день аспирации ооцитов на более чем 20% поверхности эпителия нами было расценено как достоверный признак опережения созревания эндометрия. Несмотря на то что образование пиноподий происходит под действием Р, отличий в формировании пиноподий в зависимости от уровня Р в день введения триггера овуляции мы не обнаружили. По данным различных авторов, появление пиноподий при стимуляции функции яичников значительно варьирует от 18-го до 22-го дня цикла, и в большинстве случаев зрелые пиноподии наблюдаются на 19-й день стимулированного цикла [23–25]. При этом M. Creus и соавт. (2003) при исследовании эндометрия в натуральном и стимулированном циклах у одной и той же пациентки не обнаружили различий в количестве пиноподий [26]. 
Подобную вариабельность появления пиноподий связывают с различным ответом каждой конкретной пациентки на стимуляцию суперовуляции [22]. Nikas и соавт. (1999) высказал предположение, что на количество пиноподий и продолжительность их существования стимуляция функции яичников не влияет [25]. По данным O.H. Develioglou и соавт. (1999), опережение эндометрия с точки зрения гистологического датирования, раннее уменьшение ПР в железах и ЭРα во всех клетках эндометрия коррелирует с более ранним появлением пиноподий в стимулированных циклах, что подтверждает концепцию сдвига окна имплантации вперед [27].

Подтверждением опережения развития эндометрия в стимулированных циклах можно считать и выявление умеренной экспрессии ЛИФ в эндометрии в день аспирации ооцитов, что соответствует «окну имплантации» естественного цикла. Известно, что экспрессия ЛИФ в фазе пролиферации натурального цикла минимальна, повышается после овуляции и достигает максимума в среднюю фазу секреции на 19–25-й день, снижаясь с началом менструации до базального уровня [3, 24]. Данные об экспрессии ЛИФ в стимулированных циклах ЭКО немногочисленны и противоречивы. Большинство исследователей обнаруживали снижение экспрессии ЛИФ. Так, Q.J. Chen и соавт. (2008) выявили снижение секреции ЛИФ в эндометрии стимулированных циклов [28]. В экспериментальных исследованиях на мышах при стимуляции суперовуляции в протоколах с агонистом ГнРГ также выявлено снижение экспрессии ЛИФ в эндометрии через 
48 ч после введения ХГч в сравнении с естественным циклом [29]. С другой стороны, А. Arici и соавт. (1995) продемонстрировали отсутствие зависимости продукции ЛИФ от концентрации половых стероидов в сыворотке крови [29, 30]. Данных о зависимости экспрессии ЛИФ от уровня Р в день введения ХГч в доступной нам литературе мы не нашли.

Таким образом, стимуляция функции яичников и в частности феномен ПЛ оказывает негативный эффект на рецептивность эндометрия в циклах ЭКО. Опережение развития эндометрия и изменение экспрессии маркеров рецептивности приводит к асинхронному созреванию эндометрия и эмбриона, снижая тем самым частоту наступления беременности. Однако механизмы этих изменений остаются недостаточно изученными. Необходимо дальнейшее изучение и разработка наиболее оптимальных подходов предотвращения и коррекции негативного влияния стимуляции функции яичников на эндометрий в программах ЭКО.

References

1. Shurshalina A.V., Demura T.A. Morphological and functional changes of the endometrium in the “window of implantation”. Obstetrics and gynecology. 2011; 7-2: 9-13. In Russ.
2. Tavaniotou A., Smitz J., Bourgain C., Devroey P. Ovulation induction disrupts phase function. Ann. N.Y. Acad. Sci. 2001; 943: 55-63.
3. Lessey B.A. The role of the endometrium during embryo implantation. Hum. Reprod. 2000; 15: 39-50.
4. Bourgain C., Devroey P. The endometrium in stimulated cycles for IVF. Hum. Reprod. Update. 2003; 9(6): 515-22.
5. Evans J., Hannan N.J., Hincks C., Rombauts L.J., Salamonsen L.A. Defective soil for a fertile seed? Altered endometrial development is detrimental to pregnancy success. PLoS One. 2012; 7(12): e53098.
6. Check J.H., Nowroozi K., Chase J., Nazari A., Braithwaite C. Comparison of pregnancy rates following in vitro fertilization-embryo transfer between the donors and the recipients in a donor oocyte program. J. Assist. Reprod. Genet. 1992; 9(3): 248-50.
7. Shapiro B.S., Daneshmand S.T., Garner F.C., Aguirre M., Hudson C., Shyni T. Evidence of impaired endometrial receptivity after ovarian stimulation for in vitro fertilization: a prospective randomized trial comparing fresh and frozen-thawed embryo transfer in normal responders. Fertil. Steril. 2011; 96(2): 344-8.
8. Van der Gaast M.H., Classen-Linke I., Krusche C.A., Beier-Hellwig K., Fauser B.C., Beier H.M., Macklon N.S. Impact of ovarian stimulation on mid-luteal endometrial tissue and secretion markers of receptivity. Reprod. Biomed. Online. 2008; 17(4): 553-63.
9. Levi A.J., Drews M.R., Bergh P.A., Miller B.T., Scott R.T. Jr. Controlled ovarian hyperstimulation does not adversely affect endometrial receptivity in in vitro fertilization cycles. Fertil. Steril. 2001; 76(4): 670-4.
10. Elnashar A.M. Progesterone rise on day of HCG administration (premature luteinization) in IVF: an overdue update. J. Assist. Reprod. Genet. 2010; 27(4): 149-55.
11. Melo M.A., Meseguer M., Garrido N., Bosch E., Pellicer A., Remohí J. The significance of premature luteinization in an oocyte-donation programme. Hum. Reprod. 2006; 21(6): 1503-7.
12. Venetis C.A., Kolibianakis E.M., Papanikolaou E., Bontis J., Devroey P., Tarlatzis B.C. Is progesterone elevation on the day of human chorionic gonadotrophin administration associated with the probability of pregnancy in in vitro fertilization? A systematic review and meta-analysis. Hum. Reprod. Update. 2007; 13(4): 343-55.
13. Huang C.C., Lien Y.R., Chen H.F., Chen M.J., Shieh C.J., Yao Y.L. et al. The duration of pre-ovulatory serum progesterone elevation before hCG administration affects the outcome of IVF/ICSI cycles. Hum. Reprod. 2012; 27(7): 2036-45.
14. Bosch E., Labarta E., Crespo J., Simón C., Remohí J., Jenkins J., Pellicer A. Circulation progesterone levels and ongoing pregnancy rates in controlled ovarian stimulation cycles for in vitro fertilization: analysis of over 4000 cycles. Hum. Reprod. 2010; 25(8): 2092-100.
15. Noyes R.W., Hertig A.T., Rock J. Dating the endometrial biopsy. Am. J. Obstet. Gynecol. 1975; 122(2): 262-3.
16. Ubaldi F., Bourgain C., Tournaye H., Smitz J., Van Steirteghem A., Devroey P. Endometrial evaluation by aspiration biopsy on the day of oocyte retrieval in the embryo transfer cycles in patients with serum progesterone rise during the follicular phase. Fertil. Steril. 1997; 67(3): 521-6.
17. Kolibianakis E., Bourgain C., Albano C., Osmanagaoglu K., Smitz J., Van Steirteghem A., Devroey P. Effect of ovarian stimulation with recombinant follicle-stimulating hormone, gonadotropin releasing hormone antagonists, and human chorionic gonadotropin on endometrial maturation on the day of oocyte pick-up. Fertil. Steril. 2002; 78(5): 1025-9.
18. Van Vaerenbergh I., Van Lommel L., Ghislain V., In't Veld P., Schuit F., Fatemi H.M. et al. In GnRH antagonist/rec-FSH stimulated cycles, advanced endometrial maturation on the day of oocyte retrieval correlates with altered gene expression. Hum. Reprod. 2009; 24(5): 1085-91.
19. Kyrou D., Kolibianakis E.M., Venetis C.A., Miliaras D., Theodoridis T., Tzevelekis F. et al. Steroid receptor expression in human endometrium during the follicular phase of stimulated cycles. Hum. Reprod. 2009; 24(11): 2931-5.
20. Dyuzheva E.V. Hormonal preparation of the endometrium in patients with ineffective attempts at IVF in history. Diss. M.; 2010. In Russ.
21. Papanikolaou E.G., Bourgain C., Kolibianakis E., Tournaye H., Devroey P. Steroid receptor expression in late follicular phase endometrium in GnRH antagonist IVF cycles is already altered, indicating initiation of early luteal phase transformation in the absence of secretory changes. Hum. Reprod. 2005; 20(6): 1541-7.
22. Olkhovskaya M.A. Biomarkers of “implantation window” (review of literature). Problems of reproduction. 2007; 1: 72-7. In Russ.
23. Burlev V.A., Kuzmichev L.N., Onischenko A.S., Ilyasova N.A., Schetinina N.S. Functional activity of endometrial effect on the results of IVF and embryo transfer: molecular mechanisms of fertility regulation. Problems of reproduction. 2010; 2: 41-52. In Russ.
24. Agadzhanova L. Endometrial pinopodiyas as markers of human implantation (review of literature). Problems of reproduction. 2004; 3: 6-12. In Russ.
25. Nikas G., Develioglu O.H., Toner J.P., Jones H.W. Endometrial pinopodes indicate a shift in the window of receptivity in IVF cycles. Hum. Reprod. 1999;14(3): 787-92.
26. Creus M., Ordi J., Fábregues F., Casamitjana R., Carmona F., Cardesa A. et al. The effect of different hormone therapies on integrin expression and pinopode formation in the human endometrium: a controlled study. Hum. Reprod. 2003; 18(4): 683-93.
27. Develioglu O.H., Hsiu J.G., Nikas G., Toner J.P., Oehninger S., Jones H.W.Jr. Endometrial estrogen and progesterone receptor and pinopode expression in stimulated cycles of oocyte donors. Fertil. Steril. 1999; 71(6): 1040-7.
28. Chen Q.J., Sun X.X., Li L., Gao X.H., Gemzell-Danielsson K., Cheng L.N. Effects of ovarian stimulation on endometrial integrin beta 3 and leukemia inhibitory factor expression in the peri-implantation phase. Fertil. Steril. 2008; 89(5, Suppl.): 1357-63.
29. Pan Y.M., Shi Y.F., Chen H.Z. Expression of estrogen receptor, progesterone receptor and leukemia inhibitory factor on endometrium during different ovarian stimulation protocols in mice. Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2008; 37(3): 300-3.
30. Arici A., Enqin O., Attor E., Olive D.L. Modulation of leukemia inhibitory factor gene expression and protein biosynthesis in human endometrium. J. Clin. Endocrinol. Metab. 1995; 80(60): 1908-15.

About the Authors

Mityurina Elena Viktorovna, graduate student of Academician V.I. Kulakov Research Center of Obstetrics, Gynecology, and Perinatology, Ministry of Health of Russia. 117997, Russia, Moscow, Ac. Oparina str. 4. Tel.: +79647967465. E-mail: mity-elena@yandex.ru
Perminova Svetlana Grigorievna, MD, Leading Researcher 1st gynecological department, Academician V.I. Kulakov Research Center of Obstetrics, Gynecology, and Perinatology, Ministry of Health of Russia. 117997, Russia, Moscow, Ac. Oparina str. 4. Tel.: +79162021687. E-mail: perisvet@list.ru
Demura Tatyana Alexandrovna, Candidate of medical sciences, senior researcher at the 1st Pathology Department, Academician V.I. Kulakov Research Center of Obstetrics, Gynecology, and Perinatology, Ministry of Health of Russia. 117997, Russia, Moscow, Ac. Oparina str. 4. Tel.: +74954382311. E-mail: demura-t@yandex.ru
Gallyamovа Elena Maratovna, graduate student of Academician V.I. Kulakov Research Center of Obstetrics, Gynecology, and Perinatology, Ministry of Health of Russia. 117997, Russia, Moscow, Ac. Oparina str. 4. Tel.: +79160162139. E-mail: nikson2003@inbox.ru

Similar Articles

By continuing to use our site, you consent to the processing of cookies that ensure the proper functioning of the site.