Цель исследования
Изучение профиля малых некодирующих РНК (микроРНК и пивиРНК) в культуральной среде эмбриона на 4-е сутки культивирования дляидентификации потенциальных биомаркеров качества эмбриона и его имплантационного потенциала.
Материалы и методы
Применен метод глубокого секвенирования для идентификации спектра микроРНК и пивиРНК, присутствующих в полости бластоцисты и в культуральной среде эмбриона, количественная оценка которых в 45 образцах культуральной среды эмбрионов, перенесенных вполость матки, была проведена методом ОТ-ПЦР в реальном времени.
Результаты
Уровень экспрессии микроРНК и пивиРНК в среде культивирования эмбрионов на 4 сутки после оплодотворения статистически значимо коррелирует с параметрами гаметогенеза: piR16735 и piR020401 – с количеством ОКК, let-7b-5p и piR020401 – с числом ооцитов на стадии М2 и зигот 2PN2PB, let-7i-5p и piR20497 -с количеством сперматозоидов в 1 мл эякулята, piR19675 с процентом прогрессивно подвижных сперматозоидов. МнкРНК let7b-5p, let-7i-5p, piR020401, piR16735, piR19675, piR20326, piR17716, обнаруженные в среде культивирования эмбриона на 4 сутки после оплодотворения, дифференцируют эмбрионы различной стадии развития. Наибольший вклад в имплантационный потенциал эмбриона вносят let-7i-5p, piR020401 и piR20497.
Заключение
На основании проведенного исследования представлены и научно обоснованы новые данные об особенностях развития эмбрионов на основании анализа экспрессии микрои пивиРНК в культуральной среде. Выявлены и проанализированы статистически значимые корреляции уровня экспрессии малых некодирующих РНК как с параметрами гаметогенеза, так и с наличием/отсутствием имплантации, а также стадией развития эмбриона. Анализ уровня экспрессии данных микроРНК и пивиРНК для оценки качества эмбриона и прогнозирования его имплантационного потенциала дополняет морфологические критерии качества эмбриона, разработанные Gardner et al, а также позволяет индивидуализировать и оптимизировать выбор эмбриона для переноса в полость матки. Полученные результаты могут быть использованы не только в научных целях, но и в клинической практике для индивидуализации лечения бесплодия у различных пациентов, проходящих лечение бесплодия в программах ВРТ. Метод РНК-диагностики сочетает в себе все основные критерии, предъявляемые к наиболее перспективным способам современной диагностики и на сегодняшний день служит доступной и отработанной технологией.
Полученные данные позволяют индивидуализировать и оптимизировать выбор эмбриона для переноса в полость матки. Представленные результаты могут быть использованы не только в научных целях, но и в клинической практике для индивидуализации лечения бесплодия у различных пациентов, проходящих лечение бесплодия в программах ВРТ. Метод РНК-диагностики сочетает в себе все основные критерии, предъявляемые к наиболее перспективным способам современной диагностики и на сегодняшний день служит доступной и отработанной технологией.
This data allows individualize and optimize best embryo selection. The results can be used not only for scientific purposes, but also in clinical practice for infertility treatment in various patients undergoing IVF. The RNA diagnostic method combines all the basic criteria, which makes it possible to use in different clinical situations.
